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小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF)的培養(yǎng)要注意的事項

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF)作為原代培養(yǎng)細(xì)胞，其刺激增殖的能力強且可靠、易培養(yǎng)、來源豐富，常被用作干細(xì)胞培養(yǎng)的飼養(yǎng)層。一方面提供刺激干細(xì)胞增殖的各種因子，另一方面保持干細(xì)胞的未分化狀態(tài)。雖然MEF傳代次數(shù)有限，但可早期凍存一些，不斷復(fù)蘇，保持長期使用。MEF的缺點是無法耐受G418的篩選。替代方法是從持續(xù)表達neo抗性的小鼠品系或轉(zhuǎn)基因品系來分離培養(yǎng)MEF。利用各種轉(zhuǎn)基因鼠培養(yǎng)的MEF細(xì)胞還是各種基因功能研究的良好工具。（一）材料12.5~14.5d的小鼠胚胎(3~6只小鼠／...

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一文帶你了解什么是星形膠質(zhì)細(xì)胞

星形膠質(zhì)細(xì)胞，是哺乳動物腦內(nèi)分布廣泛的一類細(xì)胞，也是膠質(zhì)細(xì)胞中體積最大的一種。用經(jīng)典的金屬浸鍍技術(shù)（銀染色）顯示此類膠質(zhì)細(xì)胞呈星形，從胞體發(fā)出許多長而分支的突起，伸展充填在神經(jīng)細(xì)胞的胞體及其突起之間，起支持和分隔神經(jīng)細(xì)胞的作用。細(xì)胞突起的末端常膨大形成腳板或稱終足，有些腳板貼附在鄰近的毛細(xì)血管壁上，因此這些腳板又被稱為血管足或血管周足，靠近腦脊髓表面的腳板則附著在軟膜內(nèi)表面，彼此連接構(gòu)成膠質(zhì)界膜。在用尼氏法等一般染色組織切片中，星形膠質(zhì)細(xì)胞的核比其他膠質(zhì)細(xì)胞的核大，呈圓形或卵...

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軟骨細(xì)胞的主要功能

軟骨細(xì)胞：幼稚的軟骨細(xì)胞位于軟骨組織的表層，單個分布，體積較小，呈橢圓形，長軸與軟骨表面平行，越向深層的軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形，細(xì)胞核圓形或卵圓形，染色淺，細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性，常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的軟骨細(xì)胞多2~8個成群分布于軟骨陷窩內(nèi)，這些軟骨細(xì)胞由同一個母細(xì)胞分裂增殖而成，稱為同源細(xì)胞群。電鏡下，軟骨細(xì)胞有突起和皺褶，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中，軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。軟骨細(xì)胞埋藏在軟骨...

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小鼠原代肝竇內(nèi)皮細(xì)胞的應(yīng)用分析

小鼠原代肝竇內(nèi)皮細(xì)胞分離自肝臟組織，是用混合酶灌流消化、反復(fù)低速離心、密度梯度離心法，并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來。肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里最大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在...

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介紹小鼠成纖維細(xì)胞的傳代流程

小鼠成纖維細(xì)胞分離自小鼠皮膚組織的貼壁細(xì)胞，成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞(mesenchymalcell)分化而來。功能活躍的細(xì)胞稱為成纖維細(xì)胞。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。纖維細(xì)胞（fibrocyte），結(jié)締組織中數(shù)目最多的細(xì)胞，相對靜止的細(xì)胞稱纖維細(xì)胞。成纖維細(xì)胞數(shù)目最多，胞體大，為多突的紡錘形或星形的扁平細(xì)胞，細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，細(xì)胞輪廓不清，具有突起。其形態(tài)尚可...

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小鼠單核巨噬細(xì)胞的注意事項！

1968年從雌性BALB/c小鼠的腫瘤中建立，J774A.1小鼠單核巨噬細(xì)胞在抗體依賴性吞噬作用中具有活性[Pubmed:1101071]。它們的生長受到硫酸葡聚糖、PPD和LPS的抑制[Pubmed:318922]。它們合成大量溶菌酶并表現(xiàn)出輕微的細(xì)胞溶解作用，但主要是抗體依賴性吞噬作用。白細(xì)胞介素1β(Il1b)由這條線連續(xù)合成。小鼠單核巨噬細(xì)胞注意事項：1)該細(xì)胞大多數(shù)是貼壁狀態(tài)，少量的懸浮細(xì)胞。細(xì)胞傳代時使用細(xì)胞刮鏟收集細(xì)胞。2)細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達70%-90%...

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關(guān)于人胚腎細(xì)胞293T的培養(yǎng)步驟說明

人胚腎細(xì)胞293T是293細(xì)胞株插入SV40T-抗原的溫度敏感基因后產(chǎn)生的高轉(zhuǎn)染效率的衍生細(xì)胞株。人胚腎細(xì)胞293T的培養(yǎng)步驟：1）培養(yǎng)皿/瓶用槍頭或移液管吸去原培養(yǎng)液；2）無菌PBS或無菌生理鹽水洗滌3次（按培養(yǎng)體積加入）；3）加入適量胰酶消化適當(dāng)時間（一般胰酶為0.25%；9cm/10cm培養(yǎng)皿和25cm培養(yǎng)瓶，一次加入1mL胰酶。消化時間視細(xì)胞類型等多種情況綜合考慮，一般如果是細(xì)胞株，非原代培養(yǎng)，消化1－2分鐘足矣）；4）用槍頭吹打數(shù)十次（視細(xì)胞類型而定。一般細(xì)胞株30...

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大鼠軟骨細(xì)胞的制備要注意的事項

軟骨細(xì)胞是軟骨組織中的主要細(xì)胞成分。位于軟骨陷窩中。軟骨細(xì)胞的核小，呈圓形或橢圓形，有1至數(shù)個核仁，胞質(zhì)略嗜堿性。細(xì)胞形狀依軟骨組織而異：在透明軟骨，靠近軟骨膜的細(xì)胞呈橢圓形，其長軸與軟骨表面平行，深部的細(xì)胞逐漸變?yōu)閳A形或卵圓形，常常兩個或多個聚集成群，稱為同源細(xì)胞群；在彈性軟骨，細(xì)胞的形態(tài)基本上與透明軟骨的相似；在纖維軟骨，細(xì)胞略呈卵圓形，夾在膠原纖維束之間，單個存在、成對存在或排列成單行。大鼠軟骨細(xì)胞分離自卵巢組織；卵巢是雌性動物的生殖器官，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激...

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