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骨髓間充質(zhì)干細胞常用的分離方法有哪些

骨髓間充質(zhì)干細胞是骨髓基質(zhì)干細胞，是人們在哺乳動物的骨髓基質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的一種具有分化形成骨、軟骨、脂肪、神經(jīng)及成肌細胞的多種分化潛能的細胞亞群。它們對骨髓中的造血干細胞（HSC）不僅有機械支持作用，還能分泌多種生長因子（如IL-6，IL-11，LIF，M-CSF及SCF等）來支持造血。目前常用的分離MSC的方法主要有全骨髓法和密度梯度離心法，全骨髓法即根據(jù)干細胞在低血清培養(yǎng)基中有貼壁優(yōu)勢特性，定期換液除去不貼壁細胞，從而達到純化及擴增MSC的目的。密度梯度離心法即根據(jù)骨髓中各細胞...

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人臍靜脈內(nèi)皮細胞系HUVEC的使用注意事項

血管內(nèi)皮細胞對維持血管動態(tài)平衡起著重要作用。它們合成、分泌凝血和纖溶系統(tǒng)的激活因子和抑制因子、影響血小板粘附和聚集的調(diào)節(jié)因子。內(nèi)皮細胞還釋放控制細胞增殖和調(diào)節(jié)血管壁緊張度的分子。這些過程都可以用培養(yǎng)的細胞進行體外研究，人臍靜脈和動脈內(nèi)皮細胞是這類研究中常用的細胞類型。除了普通的內(nèi)皮細胞特征例如“鵝卵石狀”，VIII因子陽性著色，能攝取乙酰基化低密度脂蛋白，人臍血管內(nèi)皮細CD31染色陽性。用IL-1或TNF-α預先處理過的細胞也能選擇性地表達E-selectin和VCAM。人臍...

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大鼠心肌細胞的特點及運輸保存

心肌的工作細胞包括心房肌和心室肌。心肌細胞為短柱狀，一般只有一個細胞核，心肌細胞之間有閏盤結構。該處細胞膜凹凸相嵌，并特殊分化形成橋粒，彼此緊密連接，但心肌細胞之間并無原生質(zhì)的連續(xù)。心肌細胞的細胞核多位于細胞中部，形狀似橢圓或似長方形，其長軸與肌原纖維的方向一致。肌原纖維繞核而行，核的兩端富有肌漿，其中含有豐富的糖原顆粒和線粒體，以適應心肌持續(xù)性節(jié)律收縮活動的需要。大鼠心肌細胞的細胞特性：1)組織來源于實驗動物的正常心臟組織。2)細胞鑒定：肌球蛋白重鏈(MHC)免疫熒光染色為...

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Ⅱ型肺泡細胞在調(diào)節(jié)肺免疫防御中起重要作用

Ⅱ型肺泡細胞指的是大肺泡細胞，又稱分泌細胞。分泌表面活性物質(zhì)(二棕櫚酰卵磷脂)，以降低肺泡表面張力。肺巨噬細胞，來自于血液單核細胞。吞噬了較多塵粒的被稱為塵細胞，而心衰細胞則是心力衰竭患者肺內(nèi)出現(xiàn)的吞噬了血紅蛋白分解的含鐵血黃素的巨噬細胞。肺泡與肺部毛細血管緊密相連。兩者的膜大部分融合，有助于氣體的快速擴散。而肺泡表面液體層，Ⅰ型肺泡細胞與基膜，薄層結締組織，毛細血管基膜與內(nèi)皮組成了所謂的氣一血屏障。細胞較小，成立方形或圓形，散落在I型肺泡細胞之間。核圓形，胞質(zhì)著色淺，呈泡沫...

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介紹小鼠海馬神經(jīng)元細胞HT22培養(yǎng)的注意事項

海馬椎體神經(jīng)元是海馬區(qū)的主要成分，主要功能是參與近期記憶、情緒及內(nèi)臟功能調(diào)節(jié)、是老年性癡呆、癲癇等疾病的主要病灶之一。小鼠海馬神經(jīng)元細胞HT22培養(yǎng)是研究神經(jīng)細胞生物學特性和外源干擾因素作用(細胞因子)的有效細胞模型，其在神經(jīng)生物學，發(fā)育生物學體外實驗研究中已被廣泛應用。一、傳代培養(yǎng)傳代前準備--胰蛋白酶消化--吹打分散細胞--分裝稀釋細胞--繼續(xù)培養(yǎng)1)將培養(yǎng)瓶內(nèi)舊的培養(yǎng)液棄掉，然后用D-Hanks液洗兩次，(一定要洗干凈，以免影響胰酶的消化作用)。2)加入0.25%胰酶-...

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介紹大鼠心肌細胞H9C2的試劑配制及實驗步驟

H9c2（2-1）是由B.Kimes和B.Brandt從胚胎BD1X大鼠心臟組織衍生的原始克隆細胞系的亞克隆，并且表現(xiàn)出骨骼肌的許多特性。該系中的成肌細胞將融合形成多核肌管并響應乙酰膽堿刺激。如果培養(yǎng)基中的血清濃度降至1％，則融合發(fā)生得更快。一、大鼠心肌細胞H9C2試劑配制：（1）PBS磷酸鹽緩沖液：PBS粉劑每袋加ddH2O定容至1000mL，調(diào)pH7.2，121℃，30min高壓滅菌，4℃冰箱保存。（2）DMEM-F12細胞生長培養(yǎng)液：臨用前根據(jù)需要按體積比10%加胎牛血...

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